Una serie de productos especialmente diseñados para sellos de reacción de inmunofluorescencia, fórmulas únicas hacen que la fluorescencia de los tintes ya no disminuya.Los selladores antifluorescence de uso común son:AF1,AF2,AF3,AF4,AF87,AF100,AF200,AF300,CFM-1,CFM-2Espera un momento. Algunos de estos productos incluyenDappi,Puede teñir el núcleo o el revestimiento.ADNExperimentos.

En cuanto a los endurecedores antifluorescentes, tres tipos comunes: el galato de propilo tipo fenoln-galato de propilo (NPG), P - benzodiaminas de tipo aminérgicop-Fenilendiamina (PPD), tipo Amina1,4-Diazabiciclo-octano()DABCO) trietildiamina. La teoría básica del enfriamiento por fluorescencia es la siguiente: el oxígeno disuelto ordinario en las rebanadas de tejido se convierte en oxígeno unilineal cuando se estimula, y el oxígeno unilineal es similar a los radicales libres de oxígeno. esta cosa es el principal culpable del enfriamiento por fluorescencia. el agente antisubmarino que agregamos reacciona principalmente con este culpable y elimina directamente el oxígeno unilineal. Tenga en cuenta que la adición de un agente anti - endurecimiento al agente de sellado a menudo reduce la cantidad total de fluorescencia en la etapa primaria de la estimulación, y también está relacionada conADNRiesgo de reacción de colorantes combinados. Mira las ventajas y desventajas de estos tres reactivos:PPDPuede reaccionar con tintes de cianina (especialmenteCy2), por lo que este tipo de sellos de tinte no se consideranPPDSellador;NPGNo tóxico, la tinción fluorescente de células vivas prefiere este tipo de sellador, peroNPGInterferir en el proceso de apoptosis celular, prestar más atención a los estudiantes que realizan este tipo de investigación y tratar de evitar contenerNPGSellador;DABCONo comoPPDEs tan eficaz y poco tóxico que se puede usar en células vivas, pero conNPGDel mismo modo, se interfiere en el proceso de apoptosis celular.

¿Una gran cantidad de selladores se apilan aquí, ¿ cómo encontrar rápidamente el que necesita? La idea simple es:

¿El primer paso, ¿ tipo solidificado o no solidificado? Es muy conveniente solidificar, almacenar y extraer, teniendo en cuenta la contracción de las hojas de tejido durante la solidificación y la contracción que requiere el paso de deshidratación. El tipo no solidificado debe considerar la volatilización y las fugas laterales del agente de sellado, por supuesto, se necesitan pastillas de vidrio de tapa (a veces también se necesitan almohadillas de silicona).espaciador) y a menudo es necesario sellar las láminas de vidrio, a menudo esmalte de uñas, cera dental,VALAP (mezcla igual de vaselina, lanolina y parafina mezclada en una placa de calentamiento a 60°C)Aplicar alrededor de la cubierta de vidrio, el esmalte de uñas tarda más en secarse y fijarse, y existe el riesgo de contaminar la lente; La cera dental se puede solidificar rápidamente a temperatura ambiente;VALAP (mezcla igual de vaselina, lanolina y parafina mezclada en una placa de calentamiento a 60°C)Es muy común en el sellado de células vivas.

¿Paso 2: ¿ se necesita glicerilo (soluble en agua) o no glicerilo (soluble en grasa)? La glicerina se puede mezclar con cualquier proporción de agua, se puede disolver con etanol, pero no con aceite. Sabiendo esto, es mucho más fácil elegir. ¿¿ cuál es tu sistema de reacción histoquímica? Si contiene agua, elija la base de glicerina (soluble en agua). Después de un estricto tratamiento de deshidratación, se selecciona el Grupo no glicerol (soluble en aceite).

El tercer paso es el índice de refracción del sellador. El índice de refracción seleccionado de los selladores para las películas teñidas es1.52A1.54La mejor transparencia entre ellos; Es mejor sellar el tejido sin teñir con un sellador con una alta o muy baja tasa de refracción, que puede eliminar la diferencia de fase Esférica y obtener la mejor imagen.

Introducir el agente formador de película utilizado:

Alcohol polivinílicopoli (alcohol vinílico): material polimérico orgánico, no tóxico, soluble en agua, un agente formador de película comúnmente utilizado. Se clasifican en diferentes números según su grado de polimerización y alcoholemia, por ejemploMowiol ® 4-88.PVATambién se pueden agregar otras sustancias o reacciones para el tratamiento modificado, comoPermafix-1Es modificado.PVA.

Polipirrolidona de polietileno(polivinilpirrolidona)AbreviaturaPVPEs un compuesto polimérico no iónico y un formador de película común.

Guía de compra de productos:

l AF1:El ingrediente básico es la glicerina,PBSAmortiguador, endurecedor antifluoro, otros ingredientes, etc., índice de refracción1.46,PH10Izquierda y derecha, adecuado para detectar secciones de tejido, células muertas empapadas en glicerina, PESCADO (incluido el CARD-FISH)Sellos como.

l AF2:Los ingredientes básicos son glicerina, endurecedor antifluoro, otros ingredientes, etc., sin su propio amortiguador. índice de refracción1.47La ventaja de este producto es que no tiene su propio amortiguador y puede ser compatible con cualquier otro amortiguador.

l AF3:Los ingredientes básicos sonPBSAmortiguador, endurecedor antifluoro, otros ingredientes, índice de refracción1.34Especialmente adecuado para la detección de células vivas.

l AFR3:Los ingredientes básicos sonPBSAmortiguador, un Apagador antifluoro de última generación (tipo no aminérgico y no fenol), otros ingredientes, etc.

l AF4:También conocido comoMedio de montaje de glicerol/n-propilgalatoSellador, el agente de declive antifluoro añadido es el galato de Propilon-galato de propilo (NPG).

l AF87: el lugar especial es que contiene aceite de inmersión sin fluorescencia, que es un sellador especialmente diseñado para observar bajo un espejo de alta potencia, paraDapiEl teñido es particularmente útil..DapiHay tendencia a la evacuación en tabletas selladas a base de glicerina).

l AF100:Los ingredientes básicos sonPBSAmortiguadores, declivers antifluorados, otros ingredientes, etc., este es un sellador sin glicerina, que debe combinarse conCFPVOHLa solución se utiliza con ella. Se necesita mezcla previaAF100yCFPVOHSolución, cuánto mezclar, cuánto mezclar, después de mezclar10Se agota en horas. El índice de refracción del sellador1,34 - 1,35.

l AF200:ConAF100Similar, la diferencia es,AF200Es a base de glicerina,Agente de declive antifluoro a base de amina, adecuado para antocianinas, alexa, hoeches y otros sellos.

l AF300:ConAF100Similar, la diferencia es,AF300Es un agente de declive antifluoro a base de glicerina y fenol.

l CFMEl índice de refracción de los selladores de la serie es1.52, igual o aproximadamente igual al índice de refracción del vidrio portador y de cubierta utilizado, lo que es muy útil para obtener una imagen perfecta. Se utiliza principalmente bajo un Microscopio confocal láser, o cuando el espejo de alta potencia necesita ser sumergido en aceite para reemplazar la inmersión en aceite.CFM-1DeEl pHAproximadamente6.5,.CFM-1 Plus AntifadenteDePHEl valor es de aproximadamente10,CFM-2DepH deAproximadamente~ 8,5,CFM-3DePHEl valor está cerca de la neutralidad.

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